一、試劑純度與質(zhì)量方面
1,試劑的純度會對培養(yǎng)物生長與實驗結(jié)果造成直接影響,舉例來說,培養(yǎng)基中如酵母提取物、蛋白胨等營養(yǎng)成分需要達到生物試劑級,
防止雜質(zhì)對微生物代謝造成干擾,或者導(dǎo)致細胞毒性等。如果操作人員使用分析純或者化學(xué)純試劑,也可能因有機物、重金屬等雜質(zhì),
對培養(yǎng)物活性產(chǎn)生一定影響。
2.實驗用試劑必須全部經(jīng)過嚴格的滅菌處理,方法一般包括過濾除菌、高壓蒸汽滅菌等,這主要是為了防止引入支原體或雜菌等污染物。
舉例來說,如細胞因子、血清等生物制劑需要通過0.22μm 濾膜進行過濾處理,且培養(yǎng)基需要在 121℃的高壓下滅菌 20 分鐘。
3.為了確保試劑質(zhì)量,實驗用試劑還需要附帶合格證書,并通過空白對照實驗進行驗證。舉例來說,新批次的培養(yǎng)基需要先進行無菌測
試,在確認無污染后才能投入使用。
二、試劑兼容與穩(wěn)定方面
1.試劑需要確保和培養(yǎng)箱環(huán)境兼容,比如試劑pH值就需要和培養(yǎng)條件相匹配。舉例來說,哺乳動物的細胞培養(yǎng)一般會要求pH值為7.2至
7.4,選用碳酸氫鈉緩沖液維持,防止因培養(yǎng)箱內(nèi)二氧化碳濃度的波動引起pH劇烈變化。另外,部分如抗體、酶等試劑有著對溫度敏感
的特點,操作人員需要注意防止直接暴露于培養(yǎng)箱高溫環(huán)境,正確做法應(yīng)在分裝后于冷藏區(qū)密封存放,實驗需要使用時再臨時加入。
2.試劑在生化培養(yǎng)箱的溫度與濕度條件下需要保持穩(wěn)定,舉例來說,如氨芐青霉素等抗生素在高溫下容易出現(xiàn)降解的問題,操作人員需
要現(xiàn)配現(xiàn)用或者分裝冷存,在使用時再加入培養(yǎng)基。
三、試劑安全與環(huán)保方面
1.如臨床樣本、病毒培養(yǎng)液等試劑因為涉及病原微生物,需要在生物安全柜中進行操作,防止發(fā)生泄漏對培養(yǎng)箱造成污染。另外,為了
避免交叉感染,培養(yǎng)箱內(nèi)部需要定期使用如含氯消毒劑等專用消毒劑或者75%乙醇進行擦拭。部分如甲醛、二甲亞砜DMSO等有毒試劑,
操作人員在使用時需要佩戴好防護手套和護目鏡,防止揮發(fā)氣體可能對培養(yǎng)物與操作人員造成的危害。
2.廢棄試劑需要按照危險廢物的分類進行處理,尤其是一些含有放射性物質(zhì)、重金屬的試劑,嚴禁直接排入下水道危害環(huán)境。如含疊氮
鈉的緩沖液還需要使用專用容器收集,然后交由專業(yè)機構(gòu)進行處理。
四、試劑存儲與使用方面
1.試劑在存儲時需要嚴格遵照標簽要求,比如干擾素等試劑需要低溫保存,應(yīng)單獨存放在4℃冰箱;光敏染料、維生素等試劑需要避光,
應(yīng)選用棕色瓶存放在培養(yǎng)箱暗倉。
2.試劑在進入生化培養(yǎng)箱前,其外包裝應(yīng)用75%乙醇進行擦拭,防止外部污染帶入箱內(nèi)。在操作時,需要使用無菌吸管或者移液器,防
止交叉污染。另外,試劑開啟后應(yīng)盡快使用,防止因長時間暴露在空氣中可能導(dǎo)致的成分揮發(fā)或者污染等問題。
五、試劑管理與記錄方面
1.試劑需要做好管理工作,標注名稱、濃度、配制日期、保質(zhì)期以及責(zé)任人等信息,并定期檢查清理過期試劑。
2.在使用試劑時,需要記錄好批號、用量、實驗日期等信息,以便結(jié)果異?;蛘叱霈F(xiàn)污染時和追溯原因。

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